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CO2光照培養(yǎng)箱試驗的成功關鍵在于細節(jié)要把控好

點擊次數:1513更新時間:2021-09-28
   CO2光照培養(yǎng)箱是在常規(guī)培養(yǎng)的基礎上進行的改進,主要是通過添加CO2來滿足微生物培養(yǎng)所需的環(huán)境。主要用于組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)。根據實驗要求,將二氧化碳培養(yǎng)框分為水套式和氣套式。
  小心培養(yǎng)的細胞就這樣死掉了,是個很心痛的事情。其實影響細胞存活率的原因有很多,有時候并不是培養(yǎng)箱本身出了問題,我們的許多操作對細胞培養(yǎng)的結果也是有很大影響的,今天為大家分享一下使用CO2光照培養(yǎng)箱對細胞進行培養(yǎng)時應該注意的問題:
  1.確保所有實驗室材料都無菌
  交叉污染是細胞培養(yǎng)的大敵。即使是輕微的污染,也可能毀了幾個星期的成果。因培養(yǎng)箱內溫暖潮濕,真菌易生長,因此須注意定期清潔。此外,在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關物品放入超凈臺之前,應用酒精擦拭干凈,以避免污染。
  2.小心處理您的培養(yǎng)物
  細胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強調也不為過。劇烈搖晃,或連續(xù)的溫度波動可能會對生長產生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的,溫度均一,且遠離電動儀器。此外,盡量避免一次處理多個細胞系,因為它可能會影響細胞的基因型和表型。您還應定期完成STR圖譜分析,以確認細胞系的身份。
  3.在使用前正確解凍細胞
  盡管解凍看起來是個簡單的步驟,但須操作得當,以免傷害細胞。長時間暴露在高溫條件下會使細胞無法鋪板。因此,凍存管應當在37°C水浴中放置2分鐘,然后用條件培養(yǎng)基稀釋,以避免造成直接傷害。
  4.使用對數生長期的細胞
  細胞培養(yǎng)過程共有3個階段:停滯期、對數期和平臺期,分別代表了低細胞生長、高細胞生長和無細胞生長。有活力的細胞是健康的,快速分裂的,在對數期以70-80%的匯合度存在。
  5.利用細胞的代謝特性來優(yōu)化培養(yǎng)基
  分析使用過的培養(yǎng)基,有助于鑒定必要成分的代謝速率,包括氨基酸和維生素。從細胞生長階段和蛋白生產階段收集到的動態(tài)代謝圖譜可用來平衡基礎培養(yǎng)基和添加培養(yǎng)基,指導培養(yǎng)基的重點,有助于蛋白質的生產。
  此外,在使用CO2光照培養(yǎng)箱的過程中應關好培養(yǎng)箱的門,以免氣體外泄,影響試驗效果,制冷系統(tǒng)停止工作后,用軟布擦凈工作腔和玻璃觀察窗;每次停機前,各控制開關均應處于非工作狀態(tài)才切斷電源,只有做好這些小細節(jié),才能成功的做好實驗!
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